Коронавирус синдрома акутне дијареје свиња (САДС-ЦоВ) је новооткривени свињски ентерички патогени корона вирус који може изазвати водену дијареју код новорођених прасади и узроковати значајне економске губитке у индустрији свиња.Тренутно не постоји одговарајућа серолошка метода за процену ефикасности САДС-ЦоВ инфекције и вакцине, тако да постоји хитна потреба за коришћењем ефикасног ензимског имуносорбентног теста (ЕЛИСА) да би се надокнадио овај недостатак.Овде је конструисан рекомбинантни плазмид који експримира САДС-ЦоВ спике (С) протеин фузионисан са хуманим ИгГ Фц доменом да производи рекомбинантни бакуловирус и експримиран у ХЕК 293Ф ћелијама.С-Фц протеин је пречишћен смолом протеина Г и задржава реактивност са анти-хуманим Фц и анти-САДС-ЦоВ антителима.Затим је коришћен С-Фц протеин да се развије индиректна ЕЛИСА (С-иЕЛИСА) и оптимизују реакциони услови С-иЕЛИСА.Као резултат тога, анализом вредности ОД450нм 40 САДС-ЦоВ негативних серума потврђених имунофлуоресцентним тестом (ИФА) и Вестерн блотингом, утврђено је да је гранична вредност 0,3711.Коефицијент варијације (ЦВ) 6 САДС-ЦоВ позитивних серума унутар и између серија С-иЕЛИСА био је мањи од 10%.Тест унакрсне реактивности је показао да С-иЕЛИСА нема унакрсну реактивност са другим серумима вируса свиња.Поред тога, на основу детекције 111 клиничких узорака серума, укупна стопа подударности ИФА и С-иЕЛИСА била је 97,3%.Тест неутрализације вируса са 7 различитих вредности ОД450нм серума показао је да је вредност ОД450нм откривена помоћу С-иЕЛИСА у позитивној корелацији са тестом неутрализације вируса.Коначно, С-иЕЛИСА је изведена на 300 узорака серума фарме свиња.Комерцијални комплети других свињских ентеровируса показали су да су ИгГ позитивне стопе САДС-ЦоВ, ТГЕВ, ПДЦоВ и ПЕДВ биле 81,7%, 54% и 65,3%, респективно., 6%, респективно.Резултати показују да је С-иЕЛИСА специфичан, осетљив и репродуктиван и да се може користити за откривање инфекције САДС-ЦоВ у индустрији свиња.Овај чланак је заштићен ауторским правима.Сва права задржана.
Време поста: 22.06.2021